Blasenkrebs (BLCA) ist eine der häufigsten bösartigen Erkrankungen und der zweithäufigste Tumor des Urogenitaltrakts. Zell- und Gentherapie, die viele Vorteile bei der Behandlung von BLCA bieten, werden dringend benötigt. Allerdings gibt es eine wichtige Einschränkung bei den derzeit verwendeten einkettigen Antikörpern, die als chimäre Antigenrezeptoren (CAR) eingesetzt werden. Insbesondere führt die CAR-Aggregation zu einer CAR-T-Verarmung, die möglicherweise auf das Linker-Peptid und die Faltungsstabilität zwischen den variablen Domänen (VH und VL) des einkettigen CAR-Antikörpers zurückzuführen ist. Von Kameliden abgeleitete humanisierte Antikörper mit geringer Größe und hoher Affinität (variable Domäne der schweren Kette des schwerkettigen Antikörpers [VHH]) sind vielversprechende Alternativen.
VHH-CAR-T-Zellen der zweiten Generation, die auf Nectin4 abzielen, wurden konstruiert, und die spezifische Tötungseffizienz wurde gegen BLCA-Zellen in vitro bestimmt. Das VHH-Nectin4-CAR-Lentivirus wurde in menschliche T-Zellen transduziert und der Phänotyp der CAR-T-Zellen wurde mittels Durchflusszytometrie analysiert. Die Wirksamkeit der Zelltötung wurde unter Verwendung von Nectin4-positiven BLCA-Zellen (SW780 und RT4) und Nectin4-negativen U87-MG-Zellen als Kontrollen mit dem xCELLigence Real Time Cell Analysis System bewertet. Die Expression der Zytokinsekretion (IFN-? und IL-2) wurde mit einem Enzym-Linked-Immunosorbent-Assay gemessen.
Die Behandlung mit dem Lentivirus VHHNectin4-CAR erhöhte den Anteil der CD4+ T- und Memory-T-Zellen. VHHNectin4-CAR-T-Zellen hatten im Vergleich zur Kontrolle mit VH-VL-basierten CAR-T-Zellen eine erhöhte spezifische Tötungsfähigkeit, erkannten spezifisch Nectin4+ BLCA-Zellen, sezernierten Zytokine und vermittelten Zellapoptose. Darüber hinaus hatte VHHNectin4-CAR-T keinen Einfluss auf das Wachstum von Nectin4– U87-MG Zellen.
VHHNectin4-CAR-T Zellen wurden mit einer starken Abtötungsfähigkeit etabliert, die spezifisch Nectin4+ BLCA Zellen in vitro erkannten.
Original Paper:
Jinping Niu, Guodi Liu und Sai Zhang et al. Novel CAR-T Cells Specifically Targeting Nectin4 Exhibit Effective Anti-Tumor Efficacy in Bladder Cancer Cell Lines. BIOI. 2025. Vol. 6(1). DOI: 10.15212/bioi-2025-0041
