Philadelphia, 27. März 2025 – Forscher haben herausgefunden, dass die klinische Anwendung von BCR::ABL1 digitaler PCR eine stabile tiefe molekulare Remission der chronischen myeloischen Leukämie (CML) zuverlässig quantifizieren kann, was dabei helfen wird, zu bestimmen, bei welchen Patienten die chronische medikamentöse Behandlung möglicherweise eingestellt werden kann. Dieses für die CML einzigartige Transkript ist empfindlicher und genauer als der derzeitige Standard, die quantitative Echtzeit-PCR (RT-qPCR), um ultraniedrige Werte der leukämischen Restkrankheit zu erkennen. Die Ergebnisse werden in einer Studie in The Journal of Molecular Diagnostics, veröffentlicht von Elsevier, vorgestellt.
Studienleiter Peter E. Westerweel, MD, PhD, Abteilung für Innere Medizin, Albert-Schweitzer-Krankenhaus, Dordrecht, Niederlande, sagt: „In unserer Forschung zeigen wir, dass die digitale PCR für BCR::ABL eine ausreichend hohe Sensitivität bei fast allen (97 %) Proben von Patienten in tiefer molekularer Remission erreicht. Das molekulare Ziel wurde bei zwei Dritteln der Patienten nachgewiesen, die unterhalb der Nachweisgrenze der Standard-RT-qPCR-Technik lagen. Die digitale PCR war daher empfindlicher und genauer und ermöglichte eine zuverlässige Messung zur Auswahl von CML-Patienten in tiefer Remission, die für ein Absetzen der medikamentösen Behandlung in Frage kommen.“
BCR::ABL1 ist ein spezifisches genetisches Fusionsprotein, das für CML charakteristisch ist und entsteht, wenn zwei Gene, BCR und ABL1, abnormal miteinander verbunden werden. Mit einer zielgerichteten Therapie mit Tyrosinkinase-Inhibitoren (TKI) können Patienten mit CML tiefe molekulare Remissionen erreichen. Patienten, die diese tiefe Remission erreichen, können eine normale Lebenserwartung haben und kommen möglicherweise für einen TKI-Absetzversuch in Frage.
In einer landesweiten prospektiven Multicenterstudie wurden Proben von niederländischen Patienten mit CML gesammelt, für die ein TKI-Absetzversuch in Betracht gezogen wurde. Ab Juli 2020 wurden insgesamt 168 Proben von 136 Patienten mit CML aus 31 medizinischen Zentren bis zum Zeitpunkt der Analyse im Mai 2023 empfangen.
Zu den Ergebnissen der Studie sagt Dr. Dr. Westerweel kommentiert die Ergebnisse der Studie wie folgt: „BCR::ABL1 Mit der digitalen PCR wurde eine genaue Quantifizierung von BCR::ABL1 im Bereich von 0,0023% auf der internationalen Skala erreicht, was der klinisch relevante Grenzwert für die Vorhersage einer behandlungsfreien Remission ist. Die Zielsensitivität wurde auf MR5,0 festgelegt, was die zuverlässige Erkennung eines Transkripts in einem Hintergrund von mindestens 100.000 regulären Kopien erfordert. Dies wurde in 97 % der Untersuchungen erreicht. Mit der digitalen PCR konnte das BCR::ABL-Konstrukt in 68 % der Proben unterhalb der Nachweisgrenze der derzeitigen Standard-RT-qPCR nachgewiesen und quantifiziert werden.“
Darüber hinaus stellten die Forscher fest, dass sich die Fluoreszenz der mit der digitalen PCR-Technik erzeugten Tröpfchen von Patient zu Patient unterschied. Dies war auf einen unterschiedlichen Transkripttyp bei den einzelnen Patienten zurückzuführen. Tröpfchen mit höherer Fluoreszenz enthalten den Ziel-Transkripttyp und gelten als positiv, während Tröpfchen mit niedriger Fluoreszenz als negativ gelten.
Dr. Westerweel erklärt: „Einige Patienten haben einen sogenannten e13a2-Transkripttyp, während andere einen e14a2-Transkripttyp haben. Wir haben validiert, dass der Assay verwendet werden kann, um den Transkripttyp bei Patienten mit nachweisbarer Krankheit zu identifizieren. Diese zusätzliche Entdeckung ist sehr wichtig, da wir zuvor gezeigt haben, dass der Transkripttyp ein Risikofaktor für einen molekularen Rückfall nach Absetzen des Medikaments ist. Oft ist der Transkripttyp bei Patienten nicht bekannt und kann mit Standardtechniken nicht mehr festgestellt werden, wenn sich die Patienten in tiefer Remission befinden.“
Für die digitale PCR für BCR::ABL wurde in dieser Studie ein von der FDA zugelassener, handelsüblicher Assay verwendet, der eine allgemeine Anwendung ermöglicht. Diese Technologie könnte die Behandlung von CML verbessern, indem sie eine genauere Überwachung der minimalen Resterkrankung und eine bessere Risikobewertung für Patienten ermöglicht, die eine behandlungsfreie Remission in Betracht ziehen.
Dr. Westerweel schlussfolgert: „Digitale PCR fürBCR::ABL ist ein wertvolles und zuverlässiges Instrument zur Unterstützung der klinischen Entscheidungsfindung bei CML.“
